GLP-1介导PI3K/Akt通路拮抗AOPP诱导HTR-8/SVneo细胞凋亡的作用

王硕石; 钟梅3

2022

10.3760/cma.j.cn431274-20210220-00203

中国医师杂志   影响因子和分区

1008-1372

目的:探究磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路在胰高血糖素样肽链-1(GLP-1)拮抗晚期氧化蛋白产物(AOPP)诱导妊娠滋养细胞凋亡的保护作用机制。方法:体外培养妊娠滋养细胞HTR-8/SVneo，将细胞分为对照组、AOPP组、GLP-1组、AOPP+GLP-1组、AOPP+GLP-1+LY294002组。对照组采用1640培养基培养；AOPP组采用200 μg/ml AOPP刺激；GLP-1组采用50~100 nmol/L GLP-1刺激1 h后进行实验；AOPP+GLP-1组采用200 μg/ml AOPP刺激48 h后再加入GLP-1(50~100 nmol/L)1 h后进行实验；AOPP+GLP-1+LY294002组在AOPP+GLP-1组干预基础上再加入PI3K抑制剂LY294002。蛋白免疫印迹(Western blot)法检测PI3K/Akt通路相关蛋白磷酸化蛋白激素B(p-Akt)的表达。CCK-8比色法检测细胞活力。酶联免疫吸附法(ELISA)检测凋亡启动蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(caspase-9)，caspase-3的含量，及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyto-C)的含量。结果:AOPP刺激后，AOPP组的p-AKT表达低于对照组( P<0.05)；经50、100 nmol/L两个浓度GLP-1干预后，AOPP+GLP-1组p-AKT表达显著高于AOPP组(均 P<0.05)。经100 nmol/L GLP-1干预24、48 h后，AOPP+GLP-1组p-AKT表达显著高于AOPP组(均 P<0.05)。AOPP刺激后，AOPP组的细胞活力低于对照组( P<0.05)；经GLP-1干预后，AOPP+GLP-1组细胞活力显著高于AOPP组( P<0.05)，加入PI3K抑制剂LY294002处理后，AOPP+GLP-1+LY294002组的细胞活力显著低于AOPP+GLP-1组( P<0.05)。ELISA结果发现，AOPP刺激后，AOPP组的凋亡启动蛋白caspase-3、caspase-9，凋亡蛋白Bax及Cyto-c含量高于对照组(均 P<0.05)，抗凋亡蛋白Bcl-2含量低于对照组(均 P<0.05)；经GLP-1干预后，AOPP+GLP-1组caspase-3、caspase-9、Bax及Cyto-c含量显著低于AOPP组(均 P<0.05)，Bcl-2含量高于AOPP组( P<0.05)，加入PI3K抑制剂LY294002处理后，AOPP+GLP-1+LY294002组的Bcl-2含量低于AOPP+GLP-1组，Bax及Cyto-c含量高于AOPP+GLP-1组(均 P<0.05)。 结论:GLP-1可能介导PI3K/Akt通路拮抗AOPP诱导妊娠滋养细胞HTR-8/SVneo的凋亡。

磷酸肌醇3-激酶 原癌基因蛋白质c-akt 胰高血糖素样肽1 晚期氧化蛋白产物 妊娠滋养细胞 细胞凋亡

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2.南方医科大学南方医院妇产科，广州　510515
3.南方医科大学南方医院

王硕石,钟梅. GLP-1介导PI3K/Akt通路拮抗AOPP诱导HTR-8/SVneo细胞凋亡的作用[J]. 中国医师杂志,2022,24(4):522-526.

王硕石,&钟梅.(2022).GLP-1介导PI3K/Akt通路拮抗AOPP诱导HTR-8/SVneo细胞凋亡的作用.中国医师杂志,24(4),522-526.

王硕石,et al."GLP-1介导PI3K/Akt通路拮抗AOPP诱导HTR-8/SVneo细胞凋亡的作用".中国医师杂志 24.4(2022):522-526.